Lors de l’invasion tumorale tumorale, les cellules épithéliales tumorales acquièrent des propriétés migratoires et invasives impliquant des modifications phénotypiques importantes. Ce phénomène est associé au processus de transition épithélio-mésenchymateuse (TEM), mécanisme dynamique qui se traduit par la perte et le gain de caractéristiques épithéliales (cohésion cellulaire) et mésenchymateuses (capacités migratoires). Au niveau moléculaire, cette conversion conduit à une réorganisation ou une disparition des complexes jonctionnels. Dans cette étude, nous nous sommes particulièrement intéressés à ZO-1, molécule des jonctions serrées, qui une fois délocalisée dans le cytoplasme joue un rôle dans l’acquisition des propriétés invasives des cellules tumorales. Une étude antérieure du laboratoire a également montré un rôle de ZO-1 dans la régulation de l’expression de l’interleukine-8 (IL-8), cytokine pro-inflammatoire et pro-angiogénique. L’objectif de ce travail est d’évaluer l’implication potentielle de la voie NF-κB dans cette régulation de l’IL-8 par ZO-1.

Afin de mieux comprendre le rôle de ZO-1 dans la régulation de l’IL-8, ZO-1 a été surexprimé par transfection transitoire de son cDNA dans deux lignées cellulaires (lignée bronchique Beas-2B et mammaire SK-BR-3). L’expression de l’IL-8 ainsi que celle des molécules impliquées dans la voie de signalisation NF-κB ont été mesurées par Elisa, Western blot et qRT-PCR. L’activité du promoteur de l’IL-8 a également été analysée grâce à la technique de « gène rapporteur ». Les lignées ont été co-transfectées avec un plasmide inducteur (soit le plasmide contrôle pLNCX, soit le plasmide surexprimant ZO-1) et un plasmide rapporteur permettant l’expression de la luciférase dont le contrôle est placé sous celui du promoteur de l’IL-8. Trois rapporteurs ont été utilisés : la partie minimale du promoteur de l’IL-8 (« 131 pro IL-8 »), le même promoteur mais muté dans sa séquence de fixation du facteur de transcription NF-κB (« 131 pro IL-8 NF-κB mut »), et une séquence promotrice contenant de multiples séquences de liaison du facteur NF-κB (« NF-κB Luc »).

Nos résultats montrent que ZO-1 régule l’expression de l’IL-8 au niveau protéique et transcriptionnel. Ils indiquent également que ZO-1 contrôle l’activité du promoteur de l’IL-8 via la voie NF-κB. De plus, nos analyses en western blot révèlent une augmentation des formes phosphorylées d’IκBα et p65 en condition de surexpression de ZO-1, ce qui témoigne de l’activation de la voie NF-κB.

L’ensemble de ces résultats montre que ZO-1 régule l’expression de l’IL-8 via l’activation de la voie NF-κB, L’impact de ces régulations sur l’angiogenèse et l’inflammation tumorale médiées par l’IL-8 est en cours d’investigation.