De nombreuses études in vitro sont réalisées à partir de cultures primaires de kératinocytes en monocouche. Ces cultures cellulaires sont composées majoritairement de cellules progénitrices de la couche basale, présentant un potentiel prolifératif important mais un état de différenciation épidermique peu avancé. Afin d’étudier in vitro la physiologie du kératinocyte dans un système plus différencié, nous avons mis au point un protocole d’obtention d’épidermes reconstruits murins (RME) à partir de kératinocytes primaires issus de souriceaux nouveau-nés. La caractérisation des RME en immuno-histofluorescence montre une expression similaire à celle de la peau de souris des marqueurs de différenciation épidermique, tels que les cytokératines 6/10, la loricrine ou la filaggrine, de cadhérines et de connexines dès j5. Ces RME permettent également de mettre en évidence le blocage de la différenciation induit par les cytokines pro-inflammatoires telles que l’oncostatine M ou l’IL-22. Nous avons également comparé les profils d’expression des Toll-like Receptors des RME avec les cultures de kératinocytes en monocouche et la peau de souris. Outre l’étude des réponses des RME en conditions infectieuses et/ou inflammatoires, ce protocole ouvre la possibilité de générer des RME à partir de souris transgéniques knock-out ou knock-in.