Méthode de dosage du phthalimide et du tétrahydrophthalimide, métabolites urinaires de deux fongicides (folpel et captane respectivement), par 2D-UHPLC-MS/MS : application lors d’une exposition environnementale - 22/04/17
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Résumé |
Objectif |
Le phthalimide (PI) et le tétrahydrophthalimide (THPI) sont des biomarqueurs urinaires spécifiques de l’exposition à certains fongicides agricoles tels que le folpel pour le PI (viticulture) et le captane pour le THPI (arboriculture). Afin de documenter les valeurs usuelles mesurées en population générale, une méthode de dosage du PI et du THPI urinaires a été développée et appliquée à titre exploratoire sur des urines d’un groupe d’enfants résidant en zone viticole, potentiellement exposés au folpel présent dans leur environnement.
Méthodes |
De structure chimique similaire, le PI et le THPI sont extraits simultanément à partir d’échantillons urinaires à l‘aide d’une méthode solide-liquide (cartouche HLB 60mg Oasis®, Waters) et analysés par 2D-UHPLC-MS/MS (Shimadzu UFLCXR–Sciex QTRAP® 5500 system) à l’aide d’une colonne de chargement (XBridgeC8, 2,1×30mm ; 5μm, Waters®) et d’une colonne analytique (HSS-T3 2,1×50mm ; 1,8μm, Acquity, Waters®) maintenues à 50°C. La phase mobile se compose d’un mélange eau/méthanol, évoluant selon un gradient de concentration avec un débit fixé à 0,5mL/min. Les transitions MRM (Multiple Reaction Monitoring) des composés et des étalons internes sont les suivantes : [m/z 146,1>41,9 (PI) ; m/z 150,1>42,0 (PI-d4) ; m/z 150,02>96,0 et m/z 150,02>42,1 (THPI) ; m/z 156,2>95,8 (THPI-d6)]. Après validation, la méthode a été appliquée sur 312 urines d’enfants vivant dans une zone viticole afin de doser le PI, biomarqueur urinaire d’exposition au folpel. Les concentrations urinaires en PI sont rapportées en μg/L et également en μg/g de créatinine pour tenir compte de la diurèse de chaque enfant.
Résultats |
La méthode développée pour ce dosage permet d’obtenir des limites de détection (LDD) et de quantification (LDQ) respectivement de 0,1μg/L et 0,25μg/L pour le PI et de 0,01μg/L et 0,025μg/L pour le THPI. L’intervalle de linéarité s’étend de 0,25 à 4μg/L pour le PI et de 0,025 à 4μg/L pour le THPI. Sur les 312 urines analysées d’enfants potentiellement exposés au folpel de manière environnementale, 88 contenaient du PI (soit 28,2 % des enfants) avec une concentration médiane de 0,26μg/L (0,12–5,28μg/L ; min–max), soit 0,21μg/g de créatinine (0,05–4,72μg/g ; min–max).
Conclusion |
La méthode de dosage présentée apporte une amélioration des performances analytiques en termes de sensibilité par rapport aux données de la littérature (LDQ du PI de 3,75μg/L et du THPI 1,90μg/L [1 ]), et en termes de spécificité avec une méthode en mode MRM et des étalons internes deutérés. Elle permet des applications en biométrologie des expositions environnementales, notamment pour des populations faiblement exposées mais également d’envisager la réalisation de biométrologie des expositions professionnelles. C’est la première étude rapportant des données de concentrations urinaires en PI en population générale résidant en zone viticole.
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Vol 29 - N° 2S
P. S35-S36 - mai 2017 Retour au numéroBienvenue sur EM-consulte, la référence des professionnels de santé.
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