Les nanoparticules lipidiques vectorisées avec le peptide NFL-TBS ciblent spécifiquement les oligodendrocytes (OL) ; elles pourraient permettre de promouvoir la remyélinisation mais leur mécanisme d’action n’est pas connu.

Déterminer les mécanismes de pénétration des nanoparticules lipidiques (LNC) vectorisées avec le peptide NFL-TBS.40-63, dont nous avions démontré l’effet de différenciation sélectif sur les OL (Fressinaud et Eyer, 2015).

Les cultures d’OL étaient traitées par différents inhibiteurs de l’endocytose, puis par LNC (100nm) marquées par un fluorochrome (DiD) et adsorbées sur NFL-TBS. L’incorporation du DiD par les OL identifiés par CNP était quantifiée par microscopie confocale. La colocalisation du DiD et de NFL (biotinylé, révélé par la streptavidine) et du DiD avec Rab5, un marqueur des endosomes précoces, étaient aussi étudiées. Enfin les LNC étaient caractérisées par microscopie électronique à transmission (MET).

La MET permettait d’observer des particules claires, alignées le long de filaments de peptide. En microscopie confocale les vues orthogonales mettaient en évidence la localisation intracytoplasmique du DiD dans les OL différenciés (CNP+). On notait également dans les OL la colocalisation du DiD avec NFL-TBS, ainsi qu’avec Rab5 (triples marquages). Différents inhibiteurs montraient l’implication de plusieurs mécanismes d’endocytose : vésicules à clathrine, à cavéoline, et macropinocytose.

Différentes approches (immunocytochimie, inhibiteurs) indiquent donc que les LNC vectorisées avec NFL-TBS sont captées par les OL in vitro en empruntant les principales voies d’endocytose. Ces propriétés pourraient être mises à profit pour favoriser la délivrance sélective d’agents remyélinisants (e.g. facteurs de croissance).

Les LNC ainsi vectorisées pourraient permettre d’apporter des molécules pro-remyélinisantes aux OL : de manière spécifique ce potentiel thérapeutique éventuel est exploré in vitro.