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Green analytical method development and validation for Flavokawain A using RP-HPLC in bulk and in-house tablet dosage forms - 21/11/25

Développement et validation d’une méthode analytique verte pour le Flavokawaïne A par RP-HPLC dans les formes posologiques en vrac et en comprimés préparés en interne

Doi : 10.1016/j.pharma.2025.11.002 
Vaishnavi Pawar, Vaibhav Kadam, Bhatu Patil, Chandrakant Gawli, Iqrar Ahamad, Harun M. Patel
 R.C. Patel Institute of Pharmaceutical Education and Research, Shirpur District-Dhule, Maharashtra, 425405, India 

Corresponding author.
En prensa. Pruebas corregidas por el autor. Disponible en línea desde el Friday 21 November 2025

Graphical abstract




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Highlights

Eco-friendly RP-HPLC method developed for quantifying Flavokawain A in bulk and tablet dosage forms.
High sensitivity and precision with LOD of 0.281μg/mL, LOQ of 0.853μg/mL, and %RSD<2%.
Excellent linearity and recovery, with R2=0.9999 and recovery between 99.2–101.3%.
Green chemistry compliant, validated by an AGREE metric score of 0.79.

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Summary

Flavokawain A, a bioactive chalcone isolated from piper methysticum (kava-kava), possesses a range of therapeutic properties, including anti-inflammatory, analgesic, cardioprotective, and anticancer activities. Despite its pharmacological potential, a dedicated and validated analytical method for its quantification has not yet been reported. This study aimed to develop and validate a simple, sensitive, and eco-friendly reverse-phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC) method for the estimation of Flavokawain A in both bulk drug and in-house tablet dosage forms. Chromatographic separation was achieved using a “Shim-pack GIST C18 column (150×4.6mm, 3μm)” with a methanol:water (85:15 v/v) mobile phase at a flow rate of 1.0mL/min. Flavokawain A was eluted at 4.8minutes, showing excellent linearity over the range of 2–12μg/mL (R2=0.9999). The method exhibited high sensitivity with LOD and LOQ values of 0.281 and 0.853μg/mL, respectively. Recovery studies showed values between 99.2% to 101.3%, with %RSD below 2%, indicating high accuracy and precision. Assay results demonstrated 100.1% content in bulk and 99.5–101.7% in tablet formulations. The method's green chemistry profile was confirmed with an analytical greenness (AGREE) metric score of 0.79. The developed RP-HPLC method is simple, accurate, precise, and environmentally sustainable, making it highly suitable for the routine quality control and research-based quantification of Flavokawain A in pharmaceutical formulations.

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Résumé

La Flavokawaïne A, une chalcone bioactive isolée du piper methysticum (kava-kava), possède un large éventail de propriétés thérapeutiques, notamment des activités anti-inflammatoires, analgésiques, cardioprotectrices et anticancéreuses. Malgré son potentiel pharmacologique, aucune méthode analytique dédiée et validée pour sa quantification n’a encore été rapportée. Cette étude visait à développer et valider une méthode de chromatographie liquide haute performance en phase inverse (RP-HPLC), simple, sensible et respectueuse de l’environnement, pour l’estimation de la Flavokawaïne A dans la substance active en vrac ainsi que dans les formes posologiques en comprimés préparées en interne. La séparation chromatographique a été réalisée à l’aide d’une colonne « Shim-pack GIST C18 (150×4,6mm, 3μm) » avec une phase mobile méthanol:eau (85:15 v/v), à un débit de 1,0mL/min. La Flavokawaïne A a été éluée à 4,8minutes, montrant une excellente linéarité dans la gamme de 2 à 12μg/mL (R2=0,9999). La méthode a démontré une grande sensibilité avec des valeurs de LOD et LOQ respectivement de 0,281μg/mL et 0,853μg/mL. Les études de récupération ont montré des valeurs comprises entre 99,2 et 101,3 %, avec un %RSD inférieur à 2 %, indiquant une grande précision et exactitude. Les résultats de dosage ont révélé une teneur de 100,1 % dans la substance en vrac et de 99,5 à 101,7 % dans les formulations en comprimés. Le profil écologique de la méthode a été confirmé par un score de 0,79 selon la métrique d’éco-compatibilité analytique (AGREE). La méthode RP-HPLC développée est simple, précise, exacte et durable sur le plan environnemental, ce qui la rend particulièrement adaptée au contrôle de qualité de routine et à la quantification de la Flavokawaïne A à des fins de recherche dans les formulations pharmaceutiques.

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Keywords : Flavokawain A, Piper methysticum, Green RP-HPLC, Method validation, Pharmaceutical analysis, Eco-friendly method

Mots clés : Flavokawaïne A, Piper methysticum, RP-HPLC verte, Validation de méthode, Analyse pharmaceutique, Méthode éco-responsable


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