L’amphotéricine B est un antifongique efficace dans le traitement des mycoses systémiques, mais l’intervalle thérapeutique est étroit et la toxicité rénale importante. Nous proposons dans ce travail de mettre au point et de valider une nouvelle méthode de dosage par CLHP de l’amphotéricine B dans le plasma. Après extraction liquide-liquide, la séparation est faite par CLHP avec détection UV/visible en utilisant une colonne RP 18 (125 mm), une phase mobile polaire composée d’eau, d’acétonitrile et d’acide acétique (51, 44, 5) (v/v/v) ajustée à pH 3. Le piroxicam est utilisé comme étalon interne. Cette méthode est linéaire pour des concentrations comprises entre 0,125 µg/mL et 8 µg/mL (r = 0,99). Les limites de détection et de quantification sont respectivement de 0,044 µg/mL et de 0,111 µg/mL. Les coefficients de variations de répétabilité et de reproductibilité sont respectivement de 1,98 à 4,66 % et de 2,69 à 4,95 % pour trois concentrations différentes. Dans ces conditions, le temps d’analyse est inférieur à 10 minutes.

Amphotericin B is an effective antifungal drug used in the treatment of systemic mycosis, but it has a narrow therapeutic interval and an important renal toxicity. The aim of this study is to monitor and valid a new method for Amphotericin B quantitation in plasma using HPLC with UV/visible detection. A liquid-liquid extraction was done; thereafter, a chromatographic separation was achieved using an RP 18 column (125 mm). The mobile phase is composed of water, acetonitrile and acetic acid (51/44/5) (v/v/v), pH 3. Piroxicam is used as an internal standard. This technique is linear over the range 0,125 µg/mL to 8 µg/mL (r=0,99). Detection and quantification limits were 0.044 µg/mL and 0.111 µg/mL, respectively. Within-day coefficient of variation (1,98 to 4,66 %) and day-to-day coefficient of variation (2,69 to 4,95 %) were determined at three different concentrations. Under these conditions, each analysis requires no longer than 10 min.