Background: Sphaeranthus indicus Linn. is a well-known medicinal plant in Ayurveda, traditionally used for its anti-inflammatory, hepatoprotective, and neuroactive properties. Its therapeutic potential is attributed to a wide range of phytoconstituents including sesquiterpene lactones, flavonoids, and sterols. Accurate chemical profiling is essential for its authentication and quality control.

Objective: To develop a comprehensive and reproducible HPTLC fingerprint of Sphaeranthus indicus using a Complementary Development Solvent (CDS) system across different solvent extracts.

Materials and Methods: Five extracts—methanol, n-hexane, acetone, petroleum ether, and 50% hydroethanolic—were prepared. Samples were applied on silica gel 60 F254 HPTLC plates and developed using the CAMAG HPTLC PRO system. Three solvent systems were employed: low polarity (LPDS), medium polarity (MPDS), and high polarity (HPDS). Visualization was performed under UV light (254 and 366 nm) and white light, before and after derivatization with anisaldehyde sulphuric acid and 10% methanolic sulphuric acid. Method validation parameters including precision, repeatability, and accuracy were evaluated to ensure the reliability of the fingerprinting process.

Results: All solvent systems provided distinctive chromatographic fingerprints. LPDS resolved non-polar terpenoids and steroids, MPDS effectively separated flavonoids and mid-polar compounds, while HPDS facilitated the detection of polar compounds post-derivatization. Consistent Rf values at 0.15 and 0.43 were observed across multiple extracts. Derivatization enhanced visibility and color differentiation of phytochemical classes. Method validation demonstrated high repeatability of Rf values and spot intensity, with satisfactory precision and accuracy for quantitative comparisons.

Conclusion: The developed HPTLC method using CDS provides a robust and detailed fingerprint profile for Sphaeranthus indicus. It supports effective quality control and can be employed for standardization and identification of marker compounds in herbal formulations.

Contexte: Sphaeranthus indicus Linn. est une plante médicinale bien connue de l’Ayurveda, traditionnellement utilisée pour ses propriétés anti-inflammatoires, hépatoprotectrices et neuroactives. Son potentiel thérapeutique est attribué à une large gamme de phyto-constituants, notamment les lactones sesquiterpéniques, les flavonoïdes et les stérols. Un profilage chimique précis est essentiel pour son authentification et son contrôle de qualité.

Objectif: Développer une empreinte HPTLC complète et reproductible de Sphaeranthus indicus en utilisant un système de solvants de développement complémentaires (CDS) à travers différents extraits.

Matériels et Méthodes: Cinq extraits — méthanol, n-hexane, acétone, éther de pétrole et hydroéthanolique à 50 % — ont été préparés. Les échantillons ont été appliqués sur des plaques HPTLC en gel de silice 60 F254 et développés à l’aide du système CAMAG HPTLC PRO. Trois systèmes de solvants ont été utilisés : faible polarité (LPDS), polarité intermédiaire (MPDS) et forte polarité (HPDS). La visualisation a été réalisée sous lumière UV (254 et 366 nm) et lumière blanche, avant et après dérivation avec l’acide sulfurique anisaldéhydique et l’acide sulfurique méthanolique à 10 %.

Résultats: Tous les systèmes de solvants ont fourni des empreintes chromatographiques distinctives. Le LPDS a permis de séparer les composés terpénoïdes et stéroïdes non polaires, le MPDS a été efficace pour les flavonoïdes et les composés de polarité intermédiaire, tandis que le HPDS a facilité la détection des composés polaires après dérivation. Des valeurs de Rf constantes à 0,15 et 0,43 ont été observées dans plusieurs extraits. La dérivation a amélioré la visibilité et la différenciation colorimétrique des classes de phytoconstituants.

Conclusion: La méthode HPTLC développée à l’aide du CDS fournit une empreinte robuste et détaillée de Sphaeranthus indicus. Elle constitue un outil efficace pour le contrôle de qualité et peut être utilisée pour la standardisation et l’identification de composés marqueurs dans les formulations à base de plantes.