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CliCAR: A non-genetic CAR engineering strategy to empower NK cells for targeted cancer immunotherapy - 07/01/26

Doi : 10.1016/j.biopha.2025.118691 
Su Yeon Lim a , Yeongbeom Kim a, Seungmin Han b, Hyun-Ouk Kim a, c, d, Suk-Jin Ha a, c, d, Jeong-Ann Park e, Jina Yun f, Sehyun Chae a, c, Young-Wook Won b, , Kwang Suk Lim a, c, d,
a Department of Smart Health Science and Technology, Kangwon National University, Chuncheon 24341, Republic of Korea 
b Department of Biomedical Engineering, College of Engineering, University of North Texas, TX 76203-5017, USA 
c Department of Biotechnology and Bioengineering, College of ACE, Kangwon National University, Chuncheon 24341, Republic of Korea 
d Institute of Fermentation of Brewing, Kangwon National University, Chuncheon 24341, Republic of Korea 
e Department of Environmental Engineering, College of ACE, Kangwon National University, Chuncheon 24341, Republic of Korea 
f Division of Hemato-Oncology, Department of Internal Medicine, Soonchunhyang, University Bucheon Hospital, Bucheon, Republic of Korea 

Corresponding author. ⁎⁎ Corresponding author at: Department of Smart Health Science and Technology, Kangwon National University, Chuncheon 24341, Republic of Korea. Department of Smart Health Science and Technology, Kangwon National University Chuncheon 24341 Republic of Korea

Abstract

Conventional CAR-based immunotherapy has demonstrated promising efficacy in hematological malignancies. However, the inherently low transduction efficiency of viral vectors in innate immune cells, particularly natural killer (NK) cells, represents a significant barrier to the broader application of CAR-based immunotherapies. To overcome these limitations, in this study, we developed a nonviral platform, recombinant chimeric antigen receptor fusion protein (CliCAR), that rapidly converts immune cells into CAR-expressing cells without gene editing. CliCAR protein was rapidly internalized and localized to the cell membrane of NK cells, allowing it to exhibit CAR-like functions without genetic modification. As a result, CliCAR-NK cells exhibited selective cytotoxicity against HER2-positive cancer cells and enhanced immune activation, including increased levels of IFN-γ, perforin, and granzyme B. In vivo experiments, CliCAR-NK cells significantly suppressed HER2-positive tumor growth without observable toxicity in a xenograft model, supporting its therapeutic potential. Through this study, we introduce the CliCAR system as a novel protein-based CAR expression strategy that eliminates the need for genetic engineering and viral vector-mediated delivery. The ability to confer CAR function without gene editing provides a safe, rapid, and customizable strategy to produce potent, off-the-shelf immune cell therapies applicable to a broad range of tumor types, including solid tumors.

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Graphical Abstract




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Keywords : Chimeric Antigen Receptor, NK cell, Immunotherapy, Targeted Delivery, Recombinant fusion protein


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Vol 193

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