Mise en place d’un modèle de fibrose pulmonaire murin et porcin et tests d’inhibition génique - 09/05/26
, V. Gouyer a, L. Vandomber a, C. Chenivesse b, c, J.-L. Desseyn aRésumé |
Introduction |
La fibrose pulmonaire idiopathique (FPI) est une maladie pulmonaire rare, grave et évolutive, caractérisée par une fibrose progressive et irréversible. Les traitements antifibrosants ralentissent, sans stopper le déclin de la fonction respiratoire. Les modèles expérimentaux ont des limites ; il est nécessaire de développer de nouvelles approches pour évaluer de potentielles cibles thérapeutiques. La fibrose pulmonaire ex vivo, induite par un cocktail fibrosant (CF) sur des precision-cut lung slices (PCLS), reproduit plusieurs aspects cellulaires de la FPI [1] . Dans un modèle d’explants pulmonaires embryonnaires murins (EPEM) [2] , les gènes lipocalin-2 (Lcn2) , serum amyloid protein 3 (Saa3) et serpin familyÀ member 3a (Serpina3a) ont été identifiés comme précocement surexprimés après exposition au CF avant que la fibrose n’apparaisse sur le plan histologique. Ces gènes présentent un intérêt biologique potentiel en tant que cibles thérapeutiques. L’objectif de ce travail est de développer un modèle adulte de fibrose pulmonaire ex vivo sur poumons de souris et de porc, identifier les gènes précocement surexprimés et tester leur inhibition par oligonucléotides antisens (OAS).
Méthodes |
Des PCLS ont été préparés à partir de poumons entiers de souris de type sauvage (C57BL/6) et de punchs de poumons de porc d’épaisseur 250 et 400 micromètres respectivement. À 24 h de culture, ils ont été exposés quotidiennement à un CF associant cytokines et agents irritants pendant 5 jours. La fibrose a été évaluée par le score d’Ashcroft modifié sur des coupes colorées au Trichrome de Masson et l’expression de gènes pro-fibrosants par RT-qPCR TaqMan ( Tgf-β1, Acta-2, Col1a1 ). Les gènes précocement surexprimés dans le modèle EPEM ont été recherchés par RT-qPCR TaqMan à 16 h de traitement. Les tissus traités ont ensuite été exposés à des OAS (2 μM) ciblant les gènes surexprimés. Les comparaisons statistiques ont utilisé des tests non paramétriques.
Résultats |
Les PCLS traités ont des scores de fibrose significativement plus élevés chez le porc ( n = 29 paires PCLS traités/non traités) ( Fig. 1 ) et la souris ( n = 17 paires PCLS traités/non traités) par rapport aux PCLS non traités. Le gène Tgf-β1 est surexprimé par les PCLS murins traités. À 16 h de traitement, Lcn2 ( n = 11 paires PCLS traités/non traités) et Saa3 ( n = 6 paires PCLS traités/non traités) sont surexprimés (×2,6 et ×4,3 respectivement) par les PCLS murins, alors qu’aucune différence n’est retrouvée pour Serpina3a ( n = 9 paires PCLS traités/non traités). L’expression de ces gènes n’est pas détectée pour les PCLS de porc.
Conclusion |
Nous avons développé un modèle adulte de fibrose pulmonaire ex vivo sur poumons de souris et de porc. Ce modèle est associé à une surexpression de Lcn2 et Saa3 chez la souris. Des tests d’inhibition génique par OAS ont été initiés et sont en cours d’évaluation.
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Vol 43 - N° 1
P. 25-26 - mai 2026 Retour au numéro
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