Dans le but d’améliorer le contrôle endothélial par analyse d’image des greffons conservés, nous avions sélectionné (SFO2008 025), parmi 30 colorants, deux colorants mono ou di-azoïques (Bleu Evans et Chicago Sky Blue) capables de colorer les bordures des cellules endothéliales qui deviennent ainsi visibles en fluorescence. Dans cette seconde étape, nous avons évalué la toxicité de ces 2 colorants sur 2 modèles animaux

Nous avons réalisé des autogreffes transfixiantes de cornée chez le rat (3mm, 11 greffes) et le lapin (7mm, 5 greffes). Après trépanation, l’endothélium était exposé 1 minute au colorant puis rincé au BSS avant d’être observé stérilement sous microscope à fluorescence (filtre CY3). Témoins négatifs : autogreffes sans coloration et autogreffes après destruction mécanique de l’endothélium. Le greffon était ensuite resuturé par un surjet de monofilament. Une semaine après greffe l’animal était sacrifié et énucléé. La transparence du greffon était notée. L’endothélium était coloré au rouge Alizarine et monté à plat avant d’être examiné sous microscope optique. Le reste de l’œil était observé en histologie conventionnelle.

Les colorants coloraient bien l’endothélium des animaux. Le modèle rat s’est avéré peu adapté pour cette étude endothéliale puisque les témoins non colorés présentaient des lésions endothéliales non spécifiques. Le modèle lapin était par contre bien adapté. Les greffons étaient transparents. Les deux colorants paraissaient bien tolérés. Il n’existait pas différence morphologique entre les témoins non colorés et les endothéliums colorés. Les témoins avec destruction endothéliale ne montraient pas de cicatrisation endothéliale. L’histologie ne révélait pas de signe de toxicité pour les autres tissus oculaires.

Nos travaux suggèrent que ces deux colorants azoïques n’ont pas de toxicité endothéliale chez le lapin.

L’évaluation des propriétés tinctoriales et de la toxicité de ces colorants sur des cornées humaines scientifiques ex vivo est en cours, avant d’envisager une évaluation à plus large échelle en banque de cornée.