Le génotypage RHD fœtal sur plasma maternel est une méthode novatrice et non invasive pour évaluer le risque de maladie hémolytique fœtale chez les femmes allo-immunisées anti-RH1. Après revue bibliographique, la méthodologie décrite par J.M. Minon (J Gynecol Obstet Biol Reprod 2005) a été choisie au laboratoire : les exons 4, 5 et 10 du gène RHD sont amplifiés par PCR en temps réel. Lors de la mise au point du test au laboratoire, 200 résultats de génotypage ont été comparés au phénotype RH1 à la naissance. La validation de méthode a permis de vérifier notamment la sensibilité et spécificité de la méthode, la valeur prédictive négative ; l’étude de corrélation a permis d’établir les critères d’interprétation des résultats. L’analyse de risques résiduels a permis de mesurer les limites réelles de la méthode, notamment liés à la faible concentration d’ADN dans le plasma et aux variants de ce gène. En conclusion, le génotypage RHD fœtal permet d’optimiser la prise en charge obstétricale des femmes RH:-1 allo-immunisées, par une méthode simple, fiable et peu invasive. Le laboratoire a obtenu en 2013 l’accréditation pour cet examen.

Non-invasive fetal RHD genotyping is an important tool to assess the risk of fetuse's hemolytic disease of anti-D allo-immunized pregnant woman by non-invasive method. A method of genotyping has been developed in the laboratory of Lyon-GHE according to Minon's team (J Gynecol Obstet Biol Reprod 2005): exon 4, 5, and 10 are amplified by real time PCR. At first, genotyping results of 200 pregnant women have been compared with RH1 phenotype at birth. The most important parameters of validation have been tested: the sensibility and the specificity; the negative predictive value; the correlation study permitted to define criteria of biological interpretation. The validation of this method permitted to determine critical points and the limits of the method due to the minor amount of fetal DNA in the maternal plasma and existence of many variant forms of the RHD gene.

We worked too in the perspective to the accreditation for our genetic laboratory.