Le proglucagon est scindé en de nombreux peptides ; glucagon, GRPP, MPGF dans le pancréas et GLP-1, GLP-2, oxyntomoduline et glicentine dans l'intestin. La mesure du glucagon est rendue difficile par l'homologie de structure avec la glicentine et l'oxyntomoduline. Nous avons développé un ELISA spécifique du glucagon. Le but de cette étude est l'intervalle de référence du Glucagon sur des sujets à jeun, la validation de l'ELISA et une comparaison lot à lot entre 3 cycles de production.

La spécificité a été évaluée contre l'oxyntomoduline et la glicentine. Sélectivité et linéarité ont été évaluées par des études de récupération. Le lot 1 de Glucagon ELISA a été comparé avec le lot 2 lui même avec le lot 3 sur des sérums et plasmas humains (n=17-19). Deux séries de mesures pour chaque lot. Les échantillons proviennent de donneurs apparemment sains (n=121, âge : 20-60 ans) collectés après un jeûne de 9h dans des tubes préenduits d'inhibiteurs de protéases. Un intervalle de référence a été établi selon la méthodologie C28 – A3 décrite dnas la directive CLSI.

La détection limite est 1pM. La réactivité croisée avec la glicentine est 0,8 % et avec l'oxyntomoduline 4 %. La récupération après dilution est 81-96 % et après addition 96-101 %. Selon une technique non paramétrique, l'intervalle de référecnce résultant inclut 95 % des échantillons ; la médiane est 6,5pmol/L, l'intervalle de référence < 1,49 à 17,8pmol/L. Une excellente corrélation entre les 3 lots de production avec un coefficient R2=0,994 lots 1 vs 2 et R2=0,995 lots 2 vs 3. La différence entre les 3 lots au regard de la moyenne des échantillons est 1 %. La moyenne des échantillons a un intervalle de dispersion sur la variation de 4-7 %

Ce dosage est sensible et spécifique pour la détermination du glucagon avec une excellent performance lot à lot. Nous avons etabli un intervalle de référence du glucagon chez des sujets à jeun, inférieur au picomolaire. La mesure spécifique du glucagon ainsi que l'établissement de l'intervalle de référence sont un outil pour une meilleure compréhension de la fonction physiologique de ce peptide.