Avant toute analyse moléculaire, un contrôle morphologique avec estimation du pourcentage de cellules tumorales (%CT) est nécessaire pour s’affranchir du risque de faux-négatifs. Le contexte d’accréditation selon la norme NF EN ISO 15189 impose une habilitation du personnel par une évaluation de ses compétences. L’objectif de ce travail était donc de valider l’habilitation des pathologistes du service à estimer un %CT sur prélèvement tissulaire avant extraction d’ADN pour analyse moléculaire. Les guides techniques d’accréditation des méthodes en biologie médicale et en anatomie et cytologie pathologiques ont été nos références. Le %CT correspondait à la proportion de noyaux de cellules tumorales sur l’ensemble des noyaux des cellules présentes dans la zone sélectionnée pour l’extraction de l’ADN. Les notes des évaluations externes de qualité ont été utilisées pour évaluer l’exactitude. Pour la fidélité intermédiaire, 35 estimations de 4 cas (biopsie/ponction transpariétale/pièce opératoire, fixé/congelé) ont été réalisées par 7 pathologistes sur 15 jours. Trois autres cas avec interférences (inflammation, mucus, nécrose) ont été évalués. Un résultat était satisfaisant s’il était à ±20 % du pourcentage attendu obtenu en faisant la moyenne des 35 estimations. Les performances étaient satisfaisantes puisqu’aucune estimation n’a été rendue supérieure à 20 % du pourcentage attendu. Une faible reproductibilité interpathologistes est rapportée dans la littérature. Elle n’a de répercussion que pour les cas à faible %CT, autour des seuils de sensibilité analytique des techniques moléculaires. Ce travail est un exemple de dossier d’habilitation et une étape dans la démarche d’accréditation, véritable enjeu pour l’activité future des pathologistes.

Before molecular analysis is performed, morphological control with an estimation of the tumour cell percentage (%TC) could have a major impact on mutation detection. Accreditation according to NF EN ISO 15189 commands an authorization through evaluation of skills. The objective of this work was to validate the empowerment of pathologists to estimate %TC in tissue sample prior to molecular analysis. The accreditation technical guidance methods in Medical biology and histopathology were taken as references. %TC was the ratio of tumour cell nuclei on all nuclei within the area selected for the DNA extraction. External evaluations quality scores were used for accuracy. In order to assess the intermediate precision, 35 %TC estimation were performed 15 days apart in 4 samples (biopsies, transparietal biopsies or surgical specimen, either fixed or frozen) by 7 pathologists. Three other cases with interference (inflammation, mucus, necrosis) were evaluated. A result was satisfactory if %TC were within ±20 % of expected percentage obtained by the average of 35 estimates. The performances were satisfactory since no estimate was made more than 20 % of the expected percentage. Low interpathologists reproducibility has been reported in the literature and can have a consequence on molecular analysis in samples with low %TC, where the value reach the analytical sensitivity thresholds of molecular techniques. The current report is an example of a step of the accreditation process, which is a challenge for pathologists’ activity in the future.