The use of scanning electron microscopy (SEM) coupled with energy dispersive spectroscopy (EDS) is routinely used by scientific police and increasingly described on biological samples in forensic context. However, the pre-analytical conditions of such analyses are not standardised in forensic context and each operator designs its own protocol depending on his practice. Using SEM-EDS on unprepared samples can be destructive but above all encounters technical problems. In the judiciary system, using non-destructive techniques (or less destructive as possible) is attractive to allow reiterate analyses or complementary techniques. So, in this study we try to design a SEM-EDX pre-analytical protocol for hydrated biological samples considering forensic requirement. We tested a protocol with five fragments of the legs of pigs on which a sharp wound was produced. Samples were fixed in 4% formalin for 7 days then dehydrated with absolute ethanol over 48hours. Samples were dried in ambient air for 24hours and analysed with SEM-EDS. Anatomo-pathologic examination was performed afterward. Samples were then stored again for 7 days with the same protocol before being examined again. Particle detection was possible without any technical problems on each analysis. This protocol allows reiterated SEM-EDS analyses and anatomo-pathologic examination afterward. This technique is easy to enforce and cheap, and no adaptation of forensic practice is required. Such a protocol is a prerequisite to the spread of EDS analysis use in French forensic practice.

La microscopie électronique à balayage couplée à un spectromètre d’énergie dispersible (ou analyse X/SEM-EDS) est utilisée en pratique courante par la police scientifique et de plus en plus décrite pour l’analyse d’échantillons biologiques dans un contexte médicolégal. Pour autant, il n’y a pas de standard ou recommandation concernant les conditions pré-analytiques des échantillons médicolégaux et chaque opérateur met donc au point son propre protocole en fonction de son expérience pratique. L’utilisation d’échantillons sans préparation préalable pour l’analyse X peut altérer l’échantillon mais surtout engendre des problèmes techniques. Dans le système judiciaire, l’utilisation d’une technique non destructive (ou la moins destructive possible) est intéressante car elle permet la réitération d’analyse ou des analyses complémentaires. Ainsi, dans cette étude nous avons essayé de mettre au point un protocole pré-analytique pour l’analyse X, d’échantillons biologiques hydratés en prenant en compte les contraintes médicolégales. Nous avons imaginé et testé un protocole sur cinq échantillons de pattes de cochon sur lesquelles des lésions tranchantes-contondantes ont été réalisées. Ils ont été fixées dans du formol 4 % pendant 7jours, puis déshydratées dans l’alcool absolu pendant 48h. Ils ont ensuite été séchés à l’air libre à température ambiante pendant 24h et analysé au SEM-EDS. Une analyse microscopique a ensuite été réalisée. Le même protocole a été réitéré après 7jours et les échantillons réexaminés en analyse X. La détection des particules était toujours possible sans aucun problème technique. Ce protocole permet donc la réalisation d’analyses X répétées et une analyse a posteriori anatomopathologique. Cette technique est facile à mettre en œuvre et peu coûteuse et ne demande aucune modification des habitudes médicolégales. Un tel protocole est un prérequis à l’utilisation de l’analyse X dans notre pratique médicolégale.