Timolol is a non-cardioselective beta blocker and has different combined ophthalmic dosage forms for treatment of glaucoma. This research introduce an HPLC method for the separation of three drugs used in combination with timolol simultaneously by applying isocratic mobile phase system in a single run and the same detection wavelength with short time. The drugs included in the separation procedures are; dorzolamide, brinzolamide, and brimonidine. The HPLC method was carried out through a single mobile phase system, which contains acetonitrile: 0.05M phosphate buffer at the ratio of 30:70, respectively at pH 3.5 and wavelength of 220nm. The method, regarding its simplicity allows determination of the studied drugs simultaneously using single run in about 8minutes. The method was rectilinear in the ranges of concentration: 1.25–25μg/mL for timolol, 4–80μg/mL for dorzolamide, 5–50μg/mL for brinzolamide and 2–20μg/mL for brimonidine. Different factors affecting the separation are thoroughly studied. The developed method was validated based on the official guidelines and the results were compared statistically with previously published methods and showed non-significant difference.

Le timolol est un bêta-bloquant non cardiosélectif et possède différentes formes posologiques ophtalmiques combinées pour le traitement du glaucome. Cette recherche introduit une méthode CLHP pour la séparation simultanée de trois médicaments utilisés en association avec le Timolol, en appliquant le système de phase mobile isocratique en une seule fois et avec la même longueur d’onde de détection en un temps bref. Les médicaments inclus dans les procédures de séparation sont : dorzolamide, brinzolamide et brimonidine. La méthode de CLHP a été réalisée à travers un système à une seule phase mobile, qui contient un tampon acétonitrile : 0,05M de phosphate dans un rapport de 30:70, respectivement à pH 3,5 et une longueur d’onde de 220nm. La méthode, en ce qui concerne sa simplicité, permet la détermination simultanée des médicaments étudiés en une seule fois en environ 8 min. La méthode était linéaire dans les plages de concentration suivantes : 1,25–25 μg/mL pour le Timolol, 4 à 80 μg/mL pour le dorzolamide, 5 à 50 μg/mL pour le brinzolamide et 2–20 μg/mL pour la brimonidine. Différents facteurs affectant la séparation sont étudiés de manière approfondie. La méthode développée a été validée sur la base des directives officielles et les résultats ont été comparés statistiquement avec les méthodes précédemment publiées et ont montré une différence non significative.