Objectif. - En cas d'oligospermie très sévère ou d'azoospermie exigeant une biopsie testiculaire, l'AMP est devenue possible grâce à l'injection d'un seul spermatozoïde dans l'ovule (ICSI). Cependant, si quelques spermatozoïdes supplémentaires restent disponibles pour une tentative ultérieure, leur conservation exige une méthodologie spécifique. En effet, nous montrons que la conservation classique en paillette ne permet de retrouver des gamètes lors de la décongélation que si au moins quelques dizaines de spermatozoïdes avaient pu être congelés : moins de deux gamètes sont récupérés si l'on en avait congelé 20 et aucun si l'effectif congelé était de 1 à 10 par paillette.

Matériel et méthodes. - Une technique très simple est expérimentée où les gamètes sont introduits dans une goutte de 0,5 μl du milieu de congélation, placée dans une boîte de culture sous huile. L'étanchéité de la boîte est assurée par du parafilm avant l'immersion dans l'azote liquide.

Résultats. - De cette façon, les spermatozoïdes sont toujours retrouvés, même lorsqu'un seul a été congelé.

Discussion et conclusion.- Bien que plus de la moitié des gamètes initialement mobiles perdent leur mobilité après congélation, l'assurance de leur vitalité lors du recueil (seuls les spermatozoïdes mobiles sont congelés) devrait permettre leur usage pour la conception par ICSI.

Objective. - In case of severe oligozoospermia or following testicular biopsy in case of azoospermia, fertilization remains possible by intracytoplasmic sperm injection (ICSI). However, if there are only a few spermatozoa available to be preserved for a delayed ICSI, these gametes must be cryopreserved according to a specific method. We have found that, using the straw classical technique, less than 2 sperm were recovered at thawing when 20 sperm were frozen and no sperm were available following freezing-thawing of only 1 to 10 sperm per straw. Then, the feasibility of programmed ICSI is always uncertain in these cases and unnecessary medical acts (ovarian stimulation and egg collection) as well as patient disappointment are frequent.

Material and methods. - We have tested a new technique by introducing (with an ICSI pipette) 1 to 100 sperm in a microdrop (0.5μl) of freezing medium setting in a culture dish under paraffin oil.

Results. - Following freezing-thawing the dish, all (100%) of the frozen spermatozoa were recovered.

Discussion and conclusion. - Since only motile sperm were frozen, the sperm which are non motile after thawing (more than 50%) are nevertheless considered usable for ICSI.