Objectif : Développer et valider une méthode de criblage toxicologique sur gouttes de sang séché (Dried Blood Spot,DBS) par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse haute résolution, et la comparer sur sang post-mortem à une méthode utilisée en routine (extraction QuEChERS).

Méthodes : Dix microlitres de sang déposés sur papier Whatman 903 ont été séchés, découpés en totalité, extraits au méthanol sous ultrasons (30 min) et analysés en mode data-dependent. La méthode a été validée selon l’ICH M10 (International Council for Harmonisation Multidisciplinary Guideline) pour 20 molécules, puis appliquée à 114 échantillons de sang post-mortem .

Résultats : La linéarité était satisfaisante (r² > 0,99) sur des gammes de 0,5-50, 5-500 ou 50-5 000 ng/mL selon les molécules. Les coefficients de variation et biais intra- et inter-séries étaient inférieurs à 15 %, les rendements de 10 à 83 % et les facteurs matrice normalisés de 0,8 à 8,2. Les composés étaient stables au moins 48 h à température ambiante, −20 °C et −80 °C. Le criblage a identifié 135 des 144 molécules testées (limite d’identification médiane 10 ng/mL). Sur les sangs post-mortem , la concordance qualitative était de 98,1 % (317 identifications, aucun faux positif). Sur 64 dosages appariés, la corrélation était étroite (r = 0,98), mais les concentrations sur DBS étaient supérieures d’environ 30 % (pente de Passing-Bablok 1,32 ; IC 95 % 1,22-1,43), surtout pour les opioïdes.

Conclusion : Simple, peu invasive et économique, cette méthode est un outil prometteur pour le criblage toxicologique de routine, sous réserve de prendre en compte ce biais pour toute interprétation quantitative.

Aim: To develop and validate a toxicological screening method on dried blood spots (DBS) using liquid chromatography coupled to high-resolution mass spectrometry, and to compare it on post-mortem blood with a routine method (QuEChERS extraction).

Methods: Ten microlitres of blood spotted onto Whatman 903 paper were dried, fully punched, extracted with methanol under sonication (30 min) and analyzed in data-dependent mode. The method was validated according to ICH M10 for 20 compounds, then applied to 114 post-mortem blood samples.

Results: Linearity was satisfactory (r² > 0.99) over ranges of 0.5-50, 5-500 or 50-5000 ng/mL depending on the compound. Intra- and inter-assay coefficients of variation and bias were below 15 %, recoveries ranged from 10 to 83 % and normalized matrix factors from 0.8 to 8.2. Compounds were stable for at least 48 h at room temperature, −20 °C and −80 °C. Screening identified 135 of 144 tested compounds (median limit of identification 10 ng/mL). In the post-mortem samples, qualitative agreement was 98.1 % (317 identifications, no false positive). Across 64 paired results, correlation was close (r = 0.98), but DBS concentrations were about 30 % higher (Passing-Bablok slope 1.32; 95 % CI 1.22-1.43), mainly for opioids.

Conclusion: Simple, minimally invasive and cost-effective, this method is a promising tool for routine toxicological screening, provided that this bias is taken into account for any quantitative interpretation.