L'immunophénotypage des leucémies aiguës repose sur l'analyse, en immunofluorescence par cytométrie en flux, de l'expression des marqueurs de lignée et de maturation après discrimination des blastes médullaires selon les critères morphométriques taille/granulométrie. Lors de faibles infiltrations blastiques, il peut être difficile de discriminer les blastes des éléments plus matures. Les limites de cette méthode nous ont conduit à appliquer la procédure utilisant un triple marquage incluant CD45 pour différencier les cellules immatures exprimant cet antigène de différenciation avec une densité plus faible que les cellules matures. La représentation biparamétrée CD45/SSC permet de différencier les lymphocytes des lymphoblastes, d'identifier une faible population blastique (AREB-T) ou de typer une leucémie aiguë à partir d'un prélèvement médullaire partiellement hémodilué. L'utilisation de CD45 en association avec le paramètre granulométrie fournit une procédure d'identification et de caractérisation des blastes sans séparation. Elle permet une bonne discrimination des blastes par rapport aux autres populations médullaires. Sensible, elle offre la possibilité de typer de faibles blastoses et d'étudier la maladie résiduelle.

Immunophenotypic analysis of leukemic cells involves lineage and maturation markers expression by flow cytometry, after forward and side scatter gating in order to separate bone marrow blasts. In case of low blastic marrow infiltration, it may be difficult to discriminate blasts from mature cells. Theses limits led us to apply a methodology using triple fluorescence with CD45 to discriminate immature cells, which express low values of CD45, while lymphocytes and monocytes express high levels of CD45. Gating for CD45 antigen expression and side scatter (CD45/SSC) permitted amplify the difference between lymphocytes and lymphoblats, to identify low blasts populations (RAEB) or to analyze hemodiluted bone marrow. Thus, when CD45 was combined with side scatter, it was possible to identify and characterize blasts cells without gradient density separation. This sensitive methodology allowed low marrow infiltration immunophenotype and residual disease exploration.