Evaluation d'un contrôle de qualité interne en immunocytométrie - 28/11/08

A. Mercadier *, ***, C. Gastal **
* Etablissement de transfusion sanguine de l'Assistance Publique/Hôpitaux de Paris Site Avicenne — Bobigny, France 
** Ortho-Clinical Diagnostics France — Foissy CdG, France 

Résumé

Cette étude a pour but de tester un nouveau réactif de contrôle de qualité interne. Ortho Absolute Control® (OAC), des techniques de cytométrie en flux utilisées pour le suivi des patients infectés par le virus d'immunodéficience acquise (VIH). L'OAC est une suspension de sang total périphérique recueilli sur anticoagulant. Chaque lot est préparé à partir d'un pool de donneurs et stabilisé pour une période de dux mois.

Les immunomarquages ont été effectués en triple fluorescence directe (Ortho Trio® CD4FITC/CD8PE/CD3Cy5PE) et le réactif de lyse employé repose sur le principe de lyse isotonique. Le cytomètre en flux utilisé, l'Ortho Cytoron Absolute, est, de par son principe fluidique spécifique, capable de directement compter en valeur absolue. Il est connecté à un passeur d'échatillons. L'acquisition et le traitement des données sont assurés par le logiciel ImmunoCount II® (Ortho Diagnostic Systems, Raritan, NJ). Chaque lot d'OAC est utilisé au quotidient sur une période de huit semaines.

Les moyennes des résultats obtenues sur un des lots testés (ABS 102) ont été comparées aux valeurs de référence fournies par le fabricant : les données en pourcentage (CD3+ = 77,0/77,4 ; CD3+CD4+ = 47,8/47,4 ; CD3+CD8+ = 24,4/24,9) ont montré des coeficients de variation (CV) inférieurs à 8% ; et en valeur absolue (CD3+ = 1193/1226 ; CD3+CD4+ = 742/754 ; CD3+CD8+ = 378/396), des inférieurs à 10%. Des résultats similaires ont été retrouvés avec cinq autres lots sur une période de un an.

L'OAC permet, en contrôle interne, de valider au quotidien toute la procédure d'analyse et répond au besoin d'un laboratoire de cytométrie en flux de routine.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Summary

The purpose of this study is to test a new quality control reagent Ortho Absolute Control® (OAC) for flow cytometry procedure used on HIV monitoring. The OAC is a reagent containing processed human whole blood cells in a stabilizing solution.

Immunostaining prepared in 3 color analysis Ortho® Trio CD4FITC/CD8PE/CD3Cy5PE) and hemolysing step achieved by isotonic procedure. The Ortho Cytoron Absolute® flow cytometer used in this study is designed in conjunction with its fluidic definition to provide direct absolute count. This instrument is equiped with an auto sample loader and data analysis performed on ImmunoCount II® system. Each lot tested was conducted during 8 weeks period.

The mean of one lot tested (ABS102) compared to the defined manufactured range : percentage data (CD3+ : 77.0/77.4 ; CD3+CD4+ : 47.8/47.4 ; CD3+CD8+ : 24.4/24.9) and absolute count (CD3+ : 1193/1226 ; CD3+CD4+ : 742/754 ; CD3+CD8+ : 378/396. CV values were respectively lower than 8% and 10%. Similar results obtained with five other lots of OAC during a period of one year.

According to these results OAC is a useful internal quality control assuming all steps required in clinical laboratory.

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Keyword : VIH, cytométrie en flux, contrôle de qualitéinterne, Ortho Absolute Control

Key-words : HIV, flow cytometry, quality control, Ortho Absolute Control


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Vol 1996 - N° 287

P. 19-22 - octobre 1996 Retour au numéro
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