Antibiogramme par diffusion en gélose: essai de standardisation de l'inoculum par la méthode «Presto ABG® - 28/11/08

Éliane Garrabé a, , Jean-Didier Cavallo a, Roland Fabre a, Eric Hernandez a
a Laboratoire de biologie clinique Hôpital d'Instruction des Armées Bégin 69, av. de Paris 94160 Saint Mandé, France 

*Correspondance.

Résumé

L'obtention d'un inoculum bien standardisé est une difficulté essentielle de la technique d'antibiogramme par diffusion en gélose. Les méthodes actuellement proposées sont relativement imprécises ou lourdes à appliquer en routine. Le but de cette étude est d'évaluer une méthode de standardisation simple et rapide de l'inoculum «Presto ABG (International Microbio). La sensibilité aux antibiotiques de 96 S. aureus, 96 Enterococcus, 96 P. aeruginosa et 117 entérobactéries d'espèces variées et présentant des phénotypes de sensibilité très divers a été étudiée par la méthode de diffusion en gélose avec un inoculum «Presto ABG et comparée à la détermination des concentrations minimales inhibitrices par dilution en gélose Mueller-Hinton. Tous les antibiotiques habituellement utilisés en thérapeutique pour chacune des espèces ont été testés. Un inoculateur à usage unique «Presto ABG est piqué dans une colonie d'une culture de 24 h à 37 °C puis déchargé dans 10 ml d'eau distilleée stérile. Un antibiogramme par la technique de diffusion en gélose est ensuite réalisé, ainst qu'une numération de l'inoculum bactérien. Un test de reproductibilité est effectué. La moyenne des inocula, y compris pour le test de reproductibilité se situe entre 2 et 6.106 UFC/ml. Le taux de concordance avec la méthode de référence (critères d'interprétation CASFM) est très satisfaisant. Quelques discordances très majeures sont notées ave la fosfomycine et, plus rarement, avecc les aminosides. La méthode «Presto ABG destinée à la préparation des inocula bactériens est une méthode simple et pratique permettant d'obtenir très facilement un inoculum bien standardisé.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Summary

A well standardized inoculum is a key parameter for the efficiency of antimicrobial disk susceptibility testing. Existing methods are often inaccurate and fastidious in a routine laboratory environment. The purpose of this study is to evaluate the “PRESTO ABG” (International Microbio) a new rapid and easy-to-use method for standardization of the inoculum. The evaluation was carried out using 96 S. aureaus 96 Enterococcus, 96 P. aeruginosa and 117 Enterobacteriaceae with various susceptibility phenotypes. The agar disk diffusion method associated to a “PRESTO ABG” inoculator was performed in comparison with the reference method : minimial inhibitory concentration determination by dilution in Mueller-Hinton agar. All antimicrobial agents usually used for the treatment against each species were tested. From a 24 hours incubation plate, an isolated colony was picked right in the middle by a “PRESTO ABG” inoculator and was discharged in 10 ml sterile distilled water. A susceptibility testing was performed by agar disk diffusion method, as well as enumeration of bacteria. A reproducibility test was carried. The average number of bacteria collected by the “PRESTO ABG” inoculator including reproducibility results, is comprised between 2 and 6.106 CFU/ml. The comparison with the standard method (CASFM criteria) is highly satisfactory. A few major discrepancies occurred with fosfomycin and unfrequently with the aminoglycosides. The “PRESTO ABG” is an easy and convenient method to obtain standardized inoculum.

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Keyword : antibiogramme, diffusion en gélose, inoculum, «Presto ABG

Key-Words : antibiogram, Agar disk diffusion, inoculum, “Presto ABG”


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Vol 1998 - N° 307

P. 65-69 - novembre 1998 Retour au numéro
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