Séquençage des acides nucléiques - 01/01/04
service de microbiologie, hôpital Paul Brousse, 12, avenue Paul Vaillant-Couturier, 94804 Villejuif cedex, France .
Résumé |
Le séquençage est la procédure qui permet de déterminer la séquence nucléotidique d'un acide nucléique (principalement l'ADN) afin d'obtenir l'information génétique qu'il supporte. Techniquement, ce procédé nécessite l'amplification préalable de la région à séquencer. Ensuite, la région amplifiée subit la réaction de séquençage proprement dite. En général, le fragment sert de matrice à une synthèse d'ADN complémentaire, arrêtée au hasard par incorporation de didésoxyribonucléotides marqués. L'analyse de la taille et du marquage des fragments avortés permet la détermination de la séquence nucléotidique. Après vérification, cette séquence est en général comparée à des séquences de références, d'une part pour réaliser une identification ou l'étude d'une filiation génétique, et d'autre part pour mettre en évidence des mutations d'intérêt diagnostique ou thérapeutique.
Mots-clés : ADN , séquence nucléotidique , information génétique , réaction de séquence , didésoxyribonucléo , tide , mutation , puces à ADN
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