Intégrité de l'ADN des spermatozoïdes comme élément diagnostique et pronostique de la fertilité masculine - 01/01/05
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Résumé |
Les progrès récents en biologie de la reproduction ont amélioré la compréhension de la physiologie des spermatozoïdes et des mécanismes impliqués dans la fécondation. Ces nouvelles connaissances ont mené à des tests plus élaborés de la fertilité masculine fondés sur l'intégrité génomique des spermatozoïdes. Cette revue de la littérature présente certaines de ces techniques et apporte un élément de réflexion sur l'application et l'utilisation des tests de l'intégrité de l'ADN des spermatozoïdes dans l'investigation de la fertilité masculine. L'analyse unicellulaire sur gel d'électrophorèse (COMET), l'analyse de la structure de la chromatine des spermatozoïdes (SCSA), le test in situ de cassures dans l'ADN (NT : Nick Translation) et le marquage des brins d'ADN avec la terminale désoxynucléotidyle transférase (TUNEL) sont actuellement les techniques les plus utilisées pour mesurer l'intégrité de l'ADN des spermatozoïdes en clinique. Dans une certaine optique, les techniques TUNEL, SCSA, COMET et NT sont complémentaires. Le TUNEL et le COMET peuvent mesurer les cassures simple- et double-brin de l'ADN, le SCSA peut détecter les anomalies de compaction de la chromatine et la technique NT peut détecter les cassures simple-brin d'ADN. L'origine exacte de la fragmentation de l'ADN des spermatozoïdes n'est pas encore établie. Cependant, plusieurs mécanismes ont été proposés : défaut dans le remodelage et la compaction de la chromatine notamment lors de la spermiogenèse ; production de substances oxygénées réactives par les spermatozoïdes immatures ; apoptose lors de la spermatogenèse. Il devient important de considérer les conséquences possibles de la fécondation d'un ovocyte par un spermatozoïde ayant un haut degré de fragmentation de son ADN. L'utilisation en routine de certains de ces tests doit cependant passer par une standardisation des protocoles inter-laboratoires et évidemment, par l'établissement de seuil discriminant in vivo et in vitro pour que ces tests présentent une bonne valeur prédictive dans la survenue d'une grossesse.
Le texte complet de cet article est disponible en PDF.Abstract |
Recent progress in reproductive biology has improved comprehension physiology of the spermatozoa and on the fertilization mechanisms. This new knowledge has carried out the elaboration of tests on male fertility based on sperm genomic integrity. This review presents some of these techniques and brings a reflexion element on the application and use of sperm DNA integrity in the investigation of male fertility. The single cell gel electrophoresis (COMET assay), Sperm Chromatin Structure Assay (SCSA), In Situ Nick Translation (NT: Nick Translation) and Terminal Uridine Nick-End Labelling (TUNEL assay) are actually the most currently used techniques for the measure of sperm DNA integrity in research clinic. From a certain point of view, TUNEL assay, SCSA, COMET assay and NT assay are complementary. The TUNEL and COMET can measure single and double strand breaks of DNA, the SCSA can detect the abnormalities in the chromatin compaction and the NT assay can detect the single strand breaks of DNA. The exact origin of sperm DNA fragmentation is not established yet. However, several mechanisms have been proposed: defect in the chromatin compaction during spermiogenesis; reactive oxygen species production by immature spermatozoa; apoptosis during spermatogenesis. It becomes important to consider the possible consequences of the oocyte fertilization by a spermatozoon having a high degree of DNA fragmentation. The use in routine of some of these tests must however pass by a standardization of the inter laboratory protocols and obviously, by the establishment of both in vivo and in vitro discriminating threshold values in order for these tests to present a good predictive value for pregnancy outcome.
Le texte complet de cet article est disponible en PDF.Mots clés : Fragmentation de l'ADN, Chromatine, Spermatozoïde, TUNEL, COMET, SCSA, NT, Infertilité masculine, ICSI, FIV
Keywords : DNA fragmentation, Chromatin, Spermatozoa, TUNEL assay, COMET assay, SCSA, NT, Male infertility, ICSI, IVF
Plan
Vol 33 - N° 3
P. 89-101 - mars 2005 Retour au numéroBienvenue sur EM-consulte, la référence des professionnels de santé.
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