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Minimizing red blood cell contamination while isolating mononuclear cells from whole blood: the next step for the treatment of severe hemolytic disease of the fetus/newborn - 28/08/11

Doi : 10.1067/S0002-9378(03)00813-5 
Garrett K Lam, MD a, Lalitha Subramanyam, MD a, Susan Orton, PhD b, Rod Farb, MS a, Kenneth J Moise, MD a, ⁎
From the Division of Maternal-Fetal Medicine, Department of Obstetrics and Gynecology,a and the Division of Immunology, Department of Laboratory Science,b University of North Carolina School of Medicine, Chapel Hill, NC, USA 

Reprint requests: Kenneth J. Moise, Jr, MD, 214 MacNider Bldg, CB #7516, Chapel Hill, NC 27599.

Chapel Hill, NC

Abstract

Objective

We examined whether mononuclear cell purification of human blood could be done while minimizing contamination with RhD-positive red blood cells to treat hemolytic disease of the fetus/newborn that was caused by rhesus disease.

Study design

Whole blood from 16 individuals who tested rhesus positive was diluted and centrifuged over a Ficoll gradient. The cell pellet was incubated with red blood cell lysis buffer, divided into three samples, and analyzed for cell count, mononuclear cell yield, and RhD-positive red cell contamination by flow cytometry.

Results

Mean RhD-positive red cell contamination was 0.24% (range, 0%-1.9%). The average yield of mononuclear cells was 11.5% (range, 1.8%-23.6%). Through regression analysis, 34 to180 mL of paternal whole blood would be necessary to achieve an antigen load that is sufficient for an HLA antibody response.

Conclusion

Purification of human blood is possible to produce reasonable mononuclear cell yields with minimal rhesus activity, which makes paternal leukocyte therapy a plausible treatment for severe rhesus alloimmunization.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Keywords : Paternal leukocyte therapy, monocytes, red blood cell alloimmunization, rhesus disease, hemolytic disease of the fetus/newborn


Plan


 Presented at the Twenty-Third Annual Meeting of the Society for Maternal-Fetal Medicine, San Francisco, Calif, February 3-8, 2003.


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Vol 189 - N° 4

P. 1012-1016 - octobre 2003 Retour au numéro
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