Amplification en chaîne par polymérase - 16/05/07
CNRS ESA 7060, centre universitaire des Saint-Pères, 45 rue des Saints-Pères, 75006 Paris France
Résumé |
La technique de PCR (polymerase chain reaction) ou amplification en chaîne par polymérase permet l'amplification d'une séquence d'ADN. Elle emploie des amorces d'ADN qui s'hybrident spécifiquement à une séquence cible. Une enzyme ADN polymérase permet de recopier l'ADN cible à partir de ces amorces. Cette étape, répétée de trente à quarante fois, aboutit à une amplification exponentielle de la cible, ce qui facilite sa détection. La détection est réalisée par les techniques classiques d'hybridation moléculaire employant des sondes spécifiques. L'utilisation d'une transcriptase inverse, qui transforme l'ARN en ADN avant les cycles de PCR, peut permettre l'amplification d'ARN (RT-PCR). Cette méthode, mise au point en 1985, a révolutionné le diagnostic des maladies infectieuses, mais aussi des maladies génétiques et des cancers.
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