Amplification par déplacement de brin (SDA) - 16/05/07
CNRS ESA 7060, Centre universitaire des Saint-Pères, 45, rue des Saints-Pères, 75006 Paris France
Résumé |
La technique SDA (pour strand displacement amplification ou amplification par déplacement de brin) est une méthode isotherme qui permet d'amplifier de l'ADN. Elle utilise deux enzymes thermorésistantes : une enzyme de restriction BsoBI ou BsrI et une ADN polymérase dépourvue d'activité exonucléasique (exo-). Grâce à deux couples d'amorce contenant notamment le site de coupure pour l'enzyme de restriction, un ADN cible possédant ce site de restriction est généré à l'aide de la polymérase. Sur un seul brin, la digestion enzymatique génère une extrémité 3' qui peut être allongée par la polymérase tout en déplaçant le brin adjacent. Le processus aboutit à une amplification de la cible assez rapide et peu coûteuse. Il est appliqué au diagnostic de certaines infections bactériennes.
Plan
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