Qβ-réplicase - 16/05/07
CNRS ESA 7060, centre universitaire des Saint-Pères, 45 rue des Saints-Pères, 75006 Paris France
Résumé |
L'amplification par Qβ-réplicase est une méthode d'amplification de sonde. Le bactériophage Qβ possède une ARN polymérase capable de répliquer entièrement son génome, formé d'un ARN. Celle-ci peut multiplier in vitro certains ARN possédant une structure secondaire particulière, comme le midivariant (MDV-1). Il est possible de construire une sonde en ajoutant une séquence oligonucléotidique spécifique à l'ARN MDV : le midivariant recombinant obtenu peut alors s'hybrider spécifiquement à une séquence cible donnée, et peut également être répliqué par la Qβ-réplicase. La purification des hybrides et la détection de la sonde fixée, après amplification par la Qβ-réplicase, permet de prouver la présence de la séquence cible dans l'échantillon. Des applications, dans le domaine du diagnostic des maladies sexuellement transmissibles et des pathologies respiratoires, sont actuellement en cours de développement.
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