La protéine Lnk est une molécule adaptatrice impliquée dans des mécanismes de régulation de l'activation et de la différentiation des lymphocytes et des plaquettes. Nous avons montré précédemment que Lnk est aussi exprimée et régulée dans les cellules endothéliales (CE) en réponse au tumor necrosis factor alpha (TNF). Pour évaluer le rôle de la protéine Lnk dans les CE, nous avons construit et utilisé un adénovirus recombinant pour faire surexprimer Lnk dans des cultures primaires de CE. Nos résultats indiquent que la surexpression de Lnk réduit de façon significative l'activation endothéliale reflétée par la diminution de l'expression de vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) en réponse au TNF. Par western blot, nous avons montré que Lnk n'a pas d'effet significatif sur la phosphorylation de l'inhibiteur naturel de NF B, I B et ne modifie pas la dégradation d'I B mais est associée à une expression persistante, de la forme phosphorylée (sur la sérine 473) de la kinase Akt, conséquence de l'activation de la voie phosphatidylinositol 3-kinase (PI3-kinase). L'ensemble de ces résultats suggère que Lnk pourrait agir comme un régulateur négatif de l'activation impliquant la voie PI3-kinase.

Lnk is an adaptator protein involved in B lymphocytes and platelet differentiation and in T lymphocyte activation. We previously reported on Lnk expression and regulation in endothelial cells (ECs) upon activation. In the present study, the involvement of Lnk in the tumor necrosis factor alpha (TNF) pathway was investigated in vitro through Lnk overexpression in primary cultures of human endothelial cells. Using a recombinant adenovirus encoding human Lnk, we first demonstrated that Lnk overexpression does not induce vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) suggesting that Lnk does not promote ECs activation. However, Lnk overexpression significantly reduced TNF-mediated expression of VCAM-1 (at mRNA and protein levels) in activated EC as compared with controls. Western blot analysis showed that Lnk overexpression in HUVEC was associated with phosphorylation of Akt kinase (at Ser 473) with no effect on I B, the specific inhibitor of NF B, indicating that Lnk promotes activation of the phosphatidylinositol 3-kinase (PI3-kinase) pathway in ECs. Altogether, these results suggest that, in ECs, Lnk may participate to a regulatory pathway involving the PI3-kinase and modulating the inflammatory response.