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Cytofluorimétrie sur empreintes conjonctivales au cours de la kératoconjonctivite sèche : effets de la ciclosporine topique sur l'expression d'antigène HLA DR - 08/03/08

Doi : JFO-04-2003-26-4-0181-5512-101019-ART2 

O. Galatoire [1],

C. Baudouin [1],

P.J. Pisella [2],

F. Brignole [3]

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Résumé

Cytofluorimétrie sur empreintes conjonctivales au cours de la kératoconjonctivite sèche : effets de la ciclosporine topique sur l'expression d'antigène HLA DR

But de l'étude : Des mécanismes inflammatoires et immunitaires sont impliqués dans la physiopathologie des syndromes secs oculaires (SSO). Les techniques de cytométrie de flux réalisées à partir d'empreintes conjonctivales ont permis de mettre en évidence les niveaux d'expression du marqueur inflammatoire HLA DR au niveau des cellules épithéliales conjonctivales lors du SSO. Le but de cette étude est d'évaluer les effets de la Ciclosporine A (CsA) topique sur l'expression de l'antigène de surface HLA DR par les cellules épithéliales conjonctivales pendant une période de 12 mois.

Méthode : Des empreintes conjonctivales ont été réalisées à J0, aux 3 e , 6 e et 12 e mois chez des patients atteints de SSO, dans le cadre d'une étude multicentrique européenne (Cyclosporin Dry Eye Study, Allergan, Irvine, CA). Après randomisation, les patients ont bénéficié de l'un des trois traitements suivants : CsA 0,05 %, CsA 0,1 %, excipient seul (huile de ricin). A partir du 6 e mois, les patients du groupe témoin (huile de ricin) ont été traités par CsA 0,1 %. Les empreintes conjonctivales ont été analysées par cytométrie de flux, en utilisant des anticorps monoclonaux dirigés contre l'antigène (Ag) HLA DR.

Résultats : Cent soixante-neuf patients ont été inclus dans cette étude. Lors du traitement par CsA, l'expression de l'Ag HLA DR était significativement diminuée par rapport à l'état basal, à 3, 6 et 12 mois (CsA 0,05 %) et à 6 et 12 mois (CsA 0,1 %), aussi bien en pourcentage de cellules positives qu'en unités d'expression de fluorescence. Les patients traités par excipient seul ne présentaient pas de modification d'expression de l'Ag HLA DR ni au 3 e, ni au 6 e mois. En revanche, le passage au 6 e mois à la CsA 0,1 % entraînait une baisse très significative de l'expression de l'Ag de surface au 12 e mois.

Conclusion : La CsA, en utilisation topique, réduit l'expression de l'antigène HLA DR et pourrait diminuer l'inflammation conjonctivale au cours de la kératoconjonctivite sèche.

Abstract

Flow cytometry in impression cytology during keratoconjunctivitis sicca: effects of topical cyclosporin A on HLA DR expression

Purpose: Immune-based inflammation has been observed as a common mechanism of keratoconjunctivitis sicca (KCS). In KCS-affected eyes, up-regulated expression of HLA DR by conjunctival epithelial cells has been demonstrated in impression cytology (IC) specimens using a technique of flow cytometry. The purpose of this study was to monitor the effects of topical cyclosporin A on the expression of this marker over a 12-month period of treatment.

Methods: Patients with moderate-to-severe KCS included in a large European multicenter clinical trial (Cyclosporin Dry Eye Study, Allergan, Irvine, CA) underwent collection of IC specimens at baseline, month 3, month 6, and month 12. They randomly received 0.05% or 0.1% cyclosporin A or vehicle. Patients randomized to receive vehicle received 0.1% cyclosporin A from month 6 onwards. Specimens were processed and analyzed in a masked manner by flow cytometry, using monoclonal antibodies directed to HLA DR.

Results: We included 169 patients in this study. HLA DR expression, both in percentage of positive cells and level of expression, was highly significantly reduced after 0.05 % and 0.1% cyclosporin A treatment at months 3, 6, and 12 compared with baseline values, whereas vehicle did not induce any change in HLA DR expression over time. The 0.05% and 0.1% cyclosporin emulsions were significantly more effective than the vehicle in reducing HLA DR at months 3 and 6 (0.05%) and at month 6 (0.1%).

Conclusions: Topical cyclosporin A strikingly reduced HLA DR, whereas the vehicle, used as a control tear substitute, had almost no effect. This study confirms that cyclosporin A may be effective in reducing conjunctival inflammation in moderate-to-severe KCS and is consistent with clinical results in this indication.


Mots clés : Cytométrie de flux , syndrome sec , syndrome de Gougerot-Sjögren , empreinte conjonctivale , ciclosporine

Keywords: Flow cytometry , dry eye , Sjögren syndrom , impression cytology , ciclosporin


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Vol 26 - N° 4

P. 337-343 - avril 2003 Retour au numéro
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