Dans le cadre de l’amélioration des rendements en cellules CD34 lors de la décongélation de cellule souche hématopoïétique périphérique (CSP) autologue, la déplaquettisation des greffons (plaquettes>400G/cytaphérèse), avant congélation, est un des paramètres identifiés. L’objectif de cette étude était de valider la méthode de déplaquettisation à appliquer.

Cette étude s’est déroulée en 3 temps̊:

–̊une série de prétest avec des produits de recherche afin de définir un « greffon type » (buffy-coat/plasma) se rapprochant d’une cytaphérèse ainsi que les paramètres de centrifugation à utiliser (n=3)̊;

–̊une série avec le « greffon type » préalablement défini et les paramètres de centrifugation fixés (n=3) ;

–̊une série avec des fractions de CSP allogéniques surnuméraire à congeler afin de vérifier la bonne récupération des cellules CD34 (n=3).

Les paramètres de centrifugation appliqués étaient les suivants̊: 1 à 3minutes, 10°C, 1000G, sans frein. Les spécifications attendues sont une élimination des plaquettes>40 % et une récupération des globules blancs (GB) et cellules CD34≥80 %.

Pour un greffon type, le rendement moyen d’élimination des plaquettes obtenu est de 79,6 %±6,1 et le rendement moyen de récupération en GB est de 97,7 %±2,4. Pour les CSP, le rendement moyen d’élimination des plaquettes dans une CSP est de 48,6 %±14,8, le rendement moyen de récupération en GB est de 87,6 %±0,9 et le rendement moyen de récupération en cellules CD34 est de 93,1 %±7,3.

Cette méthodologie a été validée et est actuellement utilisée en routine dans notre laboratoire avec des résultats conformes aux spécifications définies dans cette validation.