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A new method to evaluate oxidative stress in humans - 01/01/02

V.  Lubrano * ,  C.  Vassalle,  A.  L'Abbate,  G.C.  Zucchelli*Corresponding author. Tél. : +39 050 3152199 ; fax : +39 05 03 15 34 54

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Résumé

Direct measurement of oxidative stress in biological fluids requires complex laboratory instruments and extraction procedures. Aim of the study was to analyse a new colorimetric assay and to evaluate its utility in the clinical setting. Forty-four unselected outpatients were studied. Stress oxidative levels were analysed with a colorimetric determination of oxygen free radicals, the dROMs test while serum total antioxidant capability was determined by OXY-adsorbent assay. In nine patients, ELISA 8-iso-PGF plasma level determinations were obtained. The lower limit of sensitivity of dROMs test resulted 4.96 mg % H2O2. The assay was found to be linear over the range of oxidative stress levels 0-500 mg % H2O2, with correlation coefficients greater than 0.99. According to dROMs, the exposition to oxygen radical in the studied population was of moderate entity. Variation on replicate samples within or between days were lower than 5.5% and free radical levels were directly correlated with serum glucose concentration. A high significant inverse correlation between oxidative stress and total serum antioxidant levels was observed. 8-iso-PGF plasma levels were positively correlated with serum free radical levels and inversely with serum concentration of antioxidant. The present data indicate that the analysis of serum free radicals with d-ROMs test is a rapid, no expensive method with good sensitivity and reproducibility.

Résumé

L'estimation directe du stress oxydatif dans les liquides biologiques nécessite un équipement de laboratoire complexe et implique des procédures d'extraction. Le but de l'étude était d'analyser une nouvelle méthode colorimétrique et d'en évaluer l'utilité au plan clinique. 44 patients externes tout venant ont été étudiés. L'intensité du stress oxydatif a été appréciée à partir d'une détermination colorimétrique des radicaux libres oxygénés (test dROM), alors que la capacité antioxydante totale du sérum a été mesurée par la méthode OXY. Chez 9 patients, on a pu déterminer la concentration plasmatique du 8-iso-PGF2α (méthode ELISA). La limite de détection du test dROM est de 4,96 mg % d'H2O2, la méthode est linéaire entre 0 et 500 mg %. D'après ce test, l'intensité de l'exposition au radical oxygène chez les patients étudiés a été jugée modérée. Le coefficient de variation sur des échantillons mesurés en double le même jour ou un autre jour a été inférieur à 5,5 % les teneurs en radicaux libres étant directement corrélés à la concentration de glucose sérique. Une corrélation inverse hautement significative a été observée entre le stress oxydatif et la capacité antioxydante totale du sérum. Les concentrations sériques du 8-iso-PGF2α a été corrélée positivement avec les niveaux de radicaux libres et négativement avec la concentration des antioxydants. Les données présentées sont en faveur d'une analyse des radicaux libres du sérum à l'aide du test dROM pour des raisons de rapidité, de faible coût, de bonne sensibilité et reproductivité.

Mots clés  : Free radicals ; Hydroperoxide ; Lipid peroxidation ; 8-iso-PGF ; Stress oxidative.

Mots clés  : Radicaux libres ; Hydroperoxyde ; Peroxidation lipidique ; 8-iso-PGF2α ; Stress oxydatif.

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Vol 17 - N° 3

P. 172-175 - juin 2002 Retour au numéro
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