Dans le contexte actuel de démocratisation de la consommation de CBD comme drogue récréative et de son expérimentation dans un cadre médical (cannabis thérapeutique), cette étude vise à :

– déterminer si le CBD et/ou ses métabolites (7-COOH-CBD et 7-OH-CBD) interfèrent avec la méthode utilisée en routine par le laboratoire Eurofins Biomnis pour le dosage dans le plasma des cannabinoïdes comprenant le delta-9-tétrahydrocannabinol (THC), l’acide 11-nor-9-carboxy-delta-9-tétrahydrocannabinol (THC-COOH) et le 11-hydroxy-delta-9-tétrahydrocannabinol (11-OH-THC). Intérêt de vérifier la spécificité analytique car la méthode LC-MS/MS intervient en confirmation des tests de dépistage salivaires et urinaires (spécificité variable selon le fournisseur) dans un contexte médical (addictologie) et surtout réglementaire (suivi de suspension de permis de conduire). À noter l’absence de données bibliographiques concernant le dosage du CBD, du THC et de leurs métabolites dans le sang à l’aide d’une méthode similaire à celle utilisée ;

– évaluer la fréquence de prise de CBD au sein de notre population de patients, en sachant que notre laboratoire réalise chaque mois plus de 900 dosages de cannabinoïdes dans le sang ;

– contribuer à mettre au point le dosage qualitatif et quantitatif du CBD dans le plasma pour répondre à une possible recrudescence des demandes dans les années à venir.

Chromatographie en phase liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem (LC-MS/MS).

Chaîne UPLC/MS Waters avec spectromètre de masse XEVO TQD.

Échantillons testés : plasmas fluorure de sodium.

Solutions commerciales pour l’étalonnage (Cerilliant) : THC, THC-COOH, 11-OH-THC, THC-D3, THC-COOH-D3, 11-OH-THC-D3, CBD, 7-COOH-CBD, 7-OH-CBD, CBD-C3, 7-COOH-CBD-D3, 7-OH-CBD-D3.

Après ajout des standards internes deutérés, déprotéinisation des plasmas par une solution d’acétonitrile, purification sur plaque Waters μElution PRIME HLB puis injection de l’extrait sur colonne Acquity UPLC BEH 1,7μm avec un gradient de phase mobile eau-acide formique 0,1 %/acétonitrile-acide formique 0,1 %.

Essais réalisés :

– comparaison des différents étalons de référence et de leurs positions et temps de rétention ;

– évaluation qualitative et quantitative d’échantillons de patients (consommation THC isolé, CBD isolé et mixte THC+CBD) et comparaison interlaboratoires avec le LBMMS du CHU de Lyon ;

– relevé statistique de présence de CBD sur les séries analysées en routine pour confirmation de cannabis.

(1) Les temps de rétention du CBD et de ses métabolites sont significativement inférieurs à ceux du THC et de ses métabolites.

(2) Les concentrations en CBD sont comparables entre le laboratoire Eurofins Biomnis et le LBMMS du CHU de Lyon.

(3) Mise en évidence de CBD dans environ 2/3 des échantillons de patients testés en routine.

(1) Les tests réalisés démontrent l’absence d’interférence du CBD et de ses métabolites (7-COOH-CBD et 7-OH-CBD) sur le dosage dans le plasma du THC et de ses métabolites (THC-COOH et 11-OH-THC) : les temps de rétention des différentes molécules sont bien distincts sur le chromatogramme. Ainsi, l’épaulement du pic THC-COOH parfois constaté en routine chez les consommateurs de CBD ne correspond ni au CBD, ni à l’un de ses métabolites (objectif à venir : optimiser les paramètres chromatographiques de notre méthode afin de ne plus être soumis à cette interférence vraisemblablement liée à d’autres substances contenues dans les spécialités de CBD commercialisées).

(2) On constate une proportion de plus en plus importante d’échantillons contenant du CBD dans les séries analysées en routine (consommation en augmentation).

(3) Cette étude permet d’envisager le dosage du CBD dans le plasma : son identification est possible sans dégrader les performances analytiques de la méthode LC-MS/MS.