La cytométrie en flux (CMF) constitue une étape essentielle dans le diagnostic et le suivi des hémopathies malignes, notamment des hémopathies lymphoïdes matures. L'immunophénotypage permet l'identification de la lignée B, T ou natural killer (NK) de la lymphoprolifération et, dans certaines de ces pathologies, elle est nécessaire pour la classification, l'évaluation du pronostic et le suivi. Pour les hémopathies B, la confirmation d'une monotypie kappa ou lambda, la perte d'expression d'un marqueur physiologique ou l'expression d'un marqueur aberrant fait suspecter le caractère anormal de la prolifération. Des scores, fondés sur l'expression d'antigènes, permettent de poser des diagnostics, comme celui de leucémie lymphoïde chronique ou de leucémie à tricholeucocytes. Le diagnostic différentiel avec d'autres syndromes lymphoprolifératifs chroniques repose sur l'analyse d'antigènes supplémentaires, comme dans le lymphome du manteau, le lymphome folliculaire ou le lymphome splénique de la pulpe rouge. Parmi les proliférations B, les plasmocytes sont également analysables par CMF, ce qui contribue au diagnostic de myélome et à son suivi. Les lymphoproliférations d'origine T et NK, beaucoup moins fréquentes, se reconnaissent par des profils phénotypiques évocateurs-comme la perte d'expression ou la variation d'intensité de marqueurs, ou l'expression de marqueurs aberrants-et par l'analyse de la diversité de la chaîne β du récepteur de la cellule T dans un contexte clinique particulier, notamment en cas de lésions cutanées. Réalisée majoritairement sur des prélèvements sanguins ou médullaires, la CMF peut s'appliquer sur tout autre prélèvement contenant des cellules en suspension. Par exemple, dans l'humeur vitrée et le liquide cérébrospinal, la détection de grandes cellules lymphomateuses suffit à poser le diagnostic de lymphome oculaire et/ou cérébral. Plusieurs organisateurs des groupes de l'association Cytométrie hématologique francophone (CytHem) décrivent dans cet article les caractéristiques phénotypiques des principales hémopathies lymphoïdes matures.