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Effets délétères des dérivés stables du monoxyde d’azote, marqueur inflammatoire des uvéites, sur les différentes tuniques de l’œil de bœuf en culture - 09/04/09

Doi : 10.1016/j.jfo.2009.01.010 
K. Lahmar-Belguendouz a, H. Belguendouz a, D. Hartani b, O.S. Lahlou-Boukoffa c, Z. Djeraba a, A. Lammali a, C. Touil-Boukoffa a,
a Équipe « cytokines et NO Synthases », laboratoire de biologie cellulaire et moléculaire, faculté des sciences biologiques, USTHB Bab Ezzouar, El Alia, BP 32, Alger, Algérie 
b Clinique ophtalmologique, CHU Mustapha, Alger, Algérie 
c Service d’ophtalmologie, CHU Ibn Rochd, Annaba, Algérie 

Auteur correspondant.

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Résumé

Introduction

L’uvéite est une inflammation intraoculaire pouvant atteindre les différentes structures de l’œil. Elle est caractérisée par une production importante de monoxyde d’azote, estimée par la mesure de ses dérivés métaboliques stables finaux, les nitrites et les nitrates. L’effet cytotoxique de ces derniers sur la rétine bovine in vitro a été montré dans une étude antérieure. L’objectif de notre étude était d’évaluer leur effet sur la totalité des explants oculaires bovins en culture.

Méthodes

Après examen clinique, des yeux sains bovins ont été obtenus immédiatement après énucléation et ont été transportés au laboratoire à une température de +4°C. Après dissection, des explants oculaires de la partie antérieure et de la partie postérieure de l’œil ont été mis en culture dans du DMEM supplémenté de 10 % de sérum de veau fœtal, 2mM de glutamine, 100UI/ml de pénicilline et de 100UI/ml de streptomycine. Les cultures ont été traitées avec différentes concentrations de nitrites et de nitrates (300-500μM). Après un temps d’incubation (24heures-48heures), les explants oculaires ont été fixés dans du formol tamponné à 10 %, et ont fait l’objet d’une étude histologique.

Résultats

Des altérations tissulaires et cellulaires étaient observées dans toutes les structures oculaires, mais à des degrés différents selon la concentration et le temps d’incubation. Les différentes structures oculaires présentaient des sensibilités différentes vis-à-vis de la nature du métabolite et de sa concentration. La sclérotique était la structure ayant montré le plus de résistance alors que l’épithélium cornéen ainsi que celui des procès ciliaires étaient les plus atteints.

Conclusion

Cette étude montre un effet cytotoxique des nitrites et des nitrates sur les structures oculaires in vitro. Cet effet était proportionnel à la concentration et au temps d’incubation utilisés. Les altérations observées au niveau des différentes structures suggèrent l’implication du monoxyde d’azote, à travers ses dérivés, dans les lésions oculaires observées durant les uvéites.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Summary

Introduction

Uveitis is an intraocular inflammation affecting various eye segments. This disease is characterized by a high level of nitric oxide production. It is estimated via the quantification of its end products: nitrites and nitrates. In a previous study, we showed the cytotoxic effect of these molecules on bovine retina in vitro. In this study, we investigated the effect of these two molecules on cultured ocular explants in vitro.

Methods

After clinical examination, healthy bovine eyes were obtained immediately after enucleation and were transported to the laboratory at +4°C. After dissection, ocular explants from anterior and posterior segments were cultured in DMEM supplemented with 10% of FBS, 2mM glutamine, 100UI penicillin, and 100UI/ml streptomycin. Cultures were treated with either nitrites or nitrates at different concentrations (300-500μM). After culture incubation (24-48h), ocular explants were fixed in buffered formalin and the histological study was performed.

Results

All structures showed structural alterations in relation with culture duration and molecule concentrations. The different structures showed different degrees of sensitivity depending on the type and concentration of the metabolite used. Sclerotic analysis showed very little response to the two molecules, whereas the cornea and ciliary process epithelia showed the highest sensitivity.

Conclusion

Our results showed a cytotoxic effect of nitrites and nitrates on ocular structures in vitro. This effect was correlated with molecule concentration and duration of exposure. The structural alterations observed suggest that nitric oxide, via its products, is implicated in the ocular lesions observed during uveitis.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Mots clés : Monoxyde d’azote, Uvéite, Nitrites, Nitrates

Keywords : Nitric oxide, Uveitis, Nitrites, Nitrates


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Vol 32 - N° 4

P. 247-256 - avril 2009 Retour au numéro
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