L’objectif de cette étude a été de développer et valider une méthode de micro-extraction liquide-liquide dispersée (MELLD) en CL-SM/SM permettant de rechercher et quantifier 7 neuroleptiques dans le plasma et le sang total. Elle a ensuite été comparée à une méthode d’extraction liquide-liquide (ELL) conventionnelle, puis appliquée au suivi thérapeutique et pharmacologique (STP) de l’aripiprazole et au dosage de neuroleptiques post-mortem.

La prise d’essai est de 200μL, les solvants d’extraction et de dispersion utilisés pour la MELLD étaient respectivement le chloroforme et le méthanol. L’ELL est réalisée avec un mélange acétate d’éthyle : dichlorométhane : heptane (40 : 22 : 38). Les molécules incluses dans la validation sont l’aripiprazole, le flupentixol, l’halopéridol, le penfluridol, la pipampérone, la trifluopérazine et le zuclopenthixol.

La MELLD présente un rendement d’extraction inférieur à celui observé en ELL, 15,8 % à 23,9 % vs 60,6 % à 107,7 %, respectivement. Cependant, l’effet matrice était moins important pour la MELLD comparativement à l’ELL, −24,1 % à 7,5 % vs −59,3 % à −39,7 %, respectivement. La linéarité a été validée sur une gamme allant de 1 à 1000ng/mL. La comparaison des deux méthodes a mis en évidence une excellente corrélation (r²>0,98). Trente-cinq dosages ont été réalisés dans le cadre du STP de l’aripiprazole, la médiane des concentrations plasmatiques était de 148ng/mL avec un intervalle interquartile allant de 64 à 260ng/mL.

Nous avons développé et validé une méthode de MELLD sensible et robuste, utilisant un faible volume de solvant et permettant la recherche et la quantification de 7 neuroleptiques dans le plasma et le sang total. Celle-ci a été appliquée avec succès au STP de l’aripiprazole et à l’analyse de prélèvements post-mortem.

The aim of this study was to develop and validate a LC-MS/MS method devoted to neuroleptics identification and quantification in plasma and blood samples using dispersive liquid-liquid micro-extraction (DLLME). The method was then compared to a conventional liquid-liquid extraction (LLE) and applied to aripiprazole therapeutic drug monitoring (TDM) and to post-mortem samples.

Sample volume was 200μL, DLLME was carried out with dichloromethane and methanol, the extractant and the disperser solvents, respectively. LLE was performed using ethyl acetate: dichloromethane: heptane (40:22:38). Neuroleptics included were aripiprazole, flupentixol, haloperidol, pipamperone, trifluoroperazine and zuclopenthixol. Both methods were validated according to EMA guidelines.

Extraction recovery with LLE was greater than DLLME: from 60.6 to 107.7% and from 15.8 to 23.9%, respectively. However, matrix effect was higher with LLE than DLLME: from −59.3 to 39.7% and from −24.1 to 7.5%, respectively. Limit of quantification was equivalent with both methods: 1ng/mL, linearity was validated from 1 to 1000ng/mL. External quality control analysis for flupentixol, haloperidol and aripiprazole exhibited a bias lesser than 12%. Aripiprazole plasma concentrations presented a median at 148ng/mL (n=35; interquartile range: 64–260ng/mL).

We developed and validated a sensitive and robust method using a small volume of solvent and allowing the identification and quantification of 7 neuroleptics in plasma and blood samples. The method was successfully applied to aripiprazole TDM and post-mortem samples.