Les désordres congénitaux de la glycosylation (CDG pour congenital disorders of glycosylation) constituent un groupe de plus de 160 maladies héréditaires du métabolisme impactant la glycosylation. Les atteintes moléculaires concernent principalement des enzymes et transporteurs du cytosol, du réticulum endoplasmique et de l'appareil de Golgi et peuvent être à l'origine d'anomalies de la N-glycosylation, de la O-glycosylation et/ou des glycosaminoglycanes. Ces anomalies de la glycosylation peuvent se répercuter sur le repliement, l'adressage, la sécrétion, la stabilité et, in fine, la fonction de nombreuses macromolécules glycosylées (majoritairement des protéines, parfois des lipides ou des ancres glycosylphosphatidylinositol), avec des conséquences cliniques souvent importantes. Le diagnostic clinique des CDG est difficile, la plupart d'entre eux se manifestant par des atteintes multiviscérales sans signe pathognomonique. Ainsi, le biologiste spécialisé joue un rôle important dans l'orientation diagnostique, en ayant recours à un panel d'analyses permettant de mettre en évidence des anomalies de la glycosylation caractérisant les CDG. Dans cet article, après de brefs rappels sur la glycosylation et les CDG, nous présentons les techniques analytiques permettant d'étudier la glycosylation des protéines au laboratoire, avec une attention particulière portée sur l'interprétation des résultats et sur les facteurs pouvant induire une confusion diagnostique. Nous décrivons ensuite brièvement l'importance actuelle de la génétique dans la démarche diagnostique des CDG.